آلاخونه | شبکه اجتماعی دانش آموزی آلاء

ادمین
✎ ریز مباحث جلسه 79
مدت زمان 21:41
⚫️ آزمایش انجام شده در سال 1973 توسط استانلی کوهن و هربرت بایر
⚫️ تحول پژوهشهای ژنتیک توسط ← استانلی کوهن و هربرت بایر

✔️ ژن قورباغه در طی مراحل انجام شده بوسیله 2 نوع آنزیم rRNA پلیمراز شناسایی شد.
✔️ در پروکاریوتی ها ممکن است ساختارهایی از یوکاریوتی ها هم دیده شود.
✔️ اولین جانداری که دست ورزی شد ← E.coli

⚫️ مهم ترین اهداف مهندسی ژنتیک:
1.تولید ژن به مقدار زیاد
2. فرآورده آن به مقدار زیاد

⚫️ مهندسی ژنتیک برای اینکه انجام شود یکسری ابزار نیاز دارد:
1.وکتور 2.آنزیم محدود کننده 3. آنزیم لیگاز

🔺1. وکتور وسیله ای است که با آن، ژن مورد نظر را وارد سلولی که مدنظرمان است میکنیم.
🔸 معمولترین وکتورها : پلازمید ویروس
🔸پلازمید :
✔️ DNA حلقوی که در برخی باکتریها دیده میشود.
✔️DNA جانبیه
✔️ حاوی ژن هایی است که روی DNA اصلی وجود ندارند.

🔺2.آنزیم محدود کننده : برش دادن دو طرف ژن را انجام میدهد(مثل قیچی)
ولی هرجایی نمیتواند برش انجام دهد
🔸کجاها برش را انجام میدهد؟ ← توالی هایی وجود دارند به نام جایگاه تشخیص، آنزیم محدود کننده اینها را شناسایی میکنه و برش رو اونجا انجام میده
بعد توالی های کوتاهی ایجاد میشود به نام ← انتهای چسبنده
🔸انتهای چسبنده :
✔️ روی DNA است نه RNA ← پس باز U ندارد
✔️ قندش دئوکسی ریبوز است.
✔️ دارای توالی های کوتاه ، تک رشته ای و فاقد پیوند هیدروژنی.
🔸آنزیم محدود کننده آنزیم باکتریایی هست ← برای ساخته شدنش rRNA پلیمراز پروکاریوتی فعالیت میکند

🔺 آنزیم لیگاز : برقراری پیوند فسفو دی استر

ادمین
✎ریز مباحث جلسه 80
☜مدت زمان 30:03
✘ باکتریوفاژ ↔ ✔ویروسی که به باکتری حمله میکند ✔ ویروس DNA دار

▮مراحل مهندسی ژنتیک:
1.برش ژن 2.تهیه DNA نوترکیب 3.کلون کردن ژن 4.غربال کردن 5. استخراج ژن

:o: برش ژن::scissors:
✔️آنزیم محدود کننده برای جدا کردن ژن انسولین ← E.coli1
✔️جایگاه تشخیص فقط برای این آنزیم:
GAATTC
CTTAAG
:x: جایگاههای تشخیص 3 شرط دارند:
:small_orange_diamond: تعداد نوکلئوتیدهایش زوج باشد.
:small_orange_diamond: از هر 2 طرف یکسان خوانده شود.
:small_orange_diamond: اول و آخری و به ترتیب که جلو میرویم مکمل هم باشند.

✔️آنزیم E.coli1 برشی را بین نوکلئوتیدهایی که دارای G و A هستند ایجاد میکند.
✔️برای خارج کردن انسولین از DNAخطی انسان مجموعا20 پیوند شکسته میشود:☇
:small_red_triangle: 4تا فسفو دی استر شکسته میشود.
:small_red_triangle: 16 تا هیدروژنی شکسته میشود .
:small_red_triangle: این 20 پیوند 4 مولکول آب مصرف میکند
✔️تعداد قطعات حاصله = تعداد مولکولهایDNA + تعداد جایگاههای تشخیص
:sunny: در DNA خطی: اگر n جایگاه تشخیص داشته باشیم ← ( n+1 ) قطعه تولید میشه.
:sunny: در DNA حلقوی: اگر n جایگاه تشخیص داشته باشیم← ( n ) قطعه حاصل میشود.

:o: تهیه DNA نوترکیب :
✔️یک محل برش میخورد، باز میشود و قطعه مدنظر اضافه میشود ← میشود DNA نوترکیب
✔️وقتی ژن خارجی را با پلازمید ترکیب کردیم اولین اتفاقی که می افتد← برقراری پیوند هیدرژونی ( بدون آنزیم)← 16 تا
✔️ 4تا پیوند فسفو دی استر تشکیل میشه ( توسط آنزیم لیگاز)
✔️ 4 مولکول آب آزاد میشه.

:o: کلون کردن ژن
DNAهای نوترکیب را کنار باکتریها قرار میدهیم.تعداد کمی از باکتریها، DNAهای نوترکیب را جذب میکنند.
بعد بوسیله دستگاه همانند سازی باکتری( DNA پلیمراز+ هلیکاز) کلون کردن را انجام میدهند.

:o: غربال کردن:
جدا کردن باکتریهایی که DNAنوترکیب را جذب کردند از باکتریهایی که DNAنوترکیب را جذب نکردند.
←با اضافه کردن آنتی بیوتیک

:o: استخراج ژن
✔️ژن مورد نظر را از پلازمید جدا میکنیم
:interrobang: چجوری؟⋙⋙ از همان آنزیم محدود کننده اول استفاده میکنیم.
:small_red_triangle_down: ژن خارجی و پلازمید از هم جدا شدند.
:small_red_triangle: برای تفکیک این دو از دستگاه الکتروفورز استفاده میکنیم.

★ الکتروفورز :
✔️یک قطب منفی و یک قطب مثبت داره و با ژل پوشانده شده.
✔️یکسری منافذ ریزی دارد.
✔️چاهک هایی دارد← محتویاتی که داشتیم( پلازمید و ژن خارجی) رو در چاهک ها میریزیم.. (پلازمید و ژن خارجی بار منفی دارند)
✔️وقتی جریان الکتریکی برقرار کنیم این محتویات از بار منفی به سمت بار مثبت حرکت میکنند.
✔️یکسری نوارهایی تشکیل میشود.
:diamond_shape_with_a_dot_inside: ژن های خارجی به قطب مثبت نزدیکترند ( چون کوچیکترن و سریعتر حرکت میکنند)
:diamond_shape_with_a_dot_inside: و پلازمید به قطب منفی نزدیکتره
به همین ترتیب تفکیک انجام میشود :end:

Poorya Masumi
منم با حرفتون موافقم.کسی جای کسی رو نگرفته. یکی اگه خوب درس خونده باشه حتی اگه جمعیت میلیاردی هم بشه واسش فرقی نمیکنه، میتونه رشته ای که میخواد رو قبول شه. کاش مراقب حرفامون باشیم شاید بعضیا با حرفی که ما میزنیم ناامید شن.

royaaa ممنون رویا جون :cherry_blossom: :hearts: ایشالا موفق باشی

فاطمه
خواهش میکنم ^_^ ✿